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http://ipicyt.repositorioinstitucional.mx/jspui/handle/1010/683| Las proteÍnas de silenciamiento Sir2-4, Ku70, Ku80 y Rif1 regulan negativamente la expresión de locus MTL3 de Candida glabrata | |
| CANDY YURIRIA RAMIREZ ZAVALETA | |
| IRENE BEATRIZ CASTAÑO NAVARRO | |
| Acceso Abierto | |
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| Candida glabrata | |
| "Candida glabrata es una levadura patógena oportunista relacionada filogenéticamente con Saccharomyces cerevisiae. Aunque en C. glabrata no se ha encontrado un ciclo de reproducción sexual, contiene tres loci similares a los del tipo de apareamiento de S. cerevisiae (MTL), denominados MTL1, MTL2 y MTL3, así como los genes requeridos para el apareamiento, meiosis y esporulación. MTL1 se localiza en una región interna del cromosoma B y se propuso como el ortólogo del locus MAT de S. cerevisiae. MTL2 y MTL3 se localizan cerca de los telómeros de cromosomas diferentes: a 29.4 kb del telómero izquierdo en el cromosoma E y a 10.5 kb del telómero izquierdo en el cromosoma B, respectivamente. Por medio de inserciones del gen reportero URA3 a lo largo de los tres loci MTL, encontramos que en contraste con S. cerevisiae, el locus MTL3 está sujeto a silenciamiento transcripcional mientras que el locus MTL2 es activo para la transcripción, lo que apoya datos publicados previamente. Determinamos que la represión de la transcripción de los genes α1 y α2 ubicados en MTL3 se lleva a cabo por dos mecanismos. Primero, encontramos que la represión de los genes α1 y α2 se debe principalmente al silenciamiento de MTL3, que se inicia en el telómero del cromosoma B y se propaga a una distancia de 12 kb hasta MTL3, en lugar de iniciarse en silenciadores como los que flanquean los loci HMR y HML de S. cerevisiae. Sorprendentemente, y en contraste con el silenciamiento de los loci HM de S. cerevisiae, el silenciamiento de MTL3 depende absolutamente de las proteínas Ku70, Ku80 y Rif1. Por otra parte, encontramos que los genes α1 y α2, pero no el gen reportero URA3 insertado a lo largo de este locus, están reprimidos por las proteínas Hst1, Sum1 y Rfm1, que forman parte de un complejo represor de genes específicos de S. cerevisiae. Estos datos indican que α1 y α2 también están sujetos a represión específica de promotor además del silenciamiento regional proveniente del telómero. Adicionalmente, C. glabrata se adhiere in vitro a células HeLa y expresa varios genes específicos del tipo sexual y genes relacionados con la virulencia independientemente de la presencia o ausencia de la información a o α en cualquiera de los loci MTL." "Candida glabrata is an opportunistic pathogenic yeast phylogenetically related to Saccharomyces cerevisiae. Even though C. glabrata has no known sexual cycle it contains, like S. cerevisiae, three mating type-like loci (MTL) called MTL1, MTL2 and MTL3 as well as most of the genes required for mating, meiosis and sporulation. MTL1 is localized at an internal region on chromosome B and is thought to be the locus corresponding to the MAT locus in S. cerevisiae. MTL2 and MTL3 are localized close to two telomeres on different chromosomes: 29.4 kb from the left telomere on chromosome E and 10.5 kb from the left telomere on chromosome B respectively. By using URA3 reporter gene insertions at the three MTL loci, we found that in contrast to S. cerevisiae, only the MTL3 locus is subject to transcriptional silencing while the MTL2 locus is transcriptionally active, and this is in agreement with previously reported data. We determined that transcriptional repression of 1 and 2 genes localized at MTL3 is achieved by two mechanisms. First, we found that repression of 1 and 2 genes is mainly due to the silencing of MTL3 that is nucleated at the left telomere of chromosome B and spreads over 12 kb to MTL3, rather than nucleating at flanking, closely positioned cis-acting silencers, like those flanking HMR and HML of S. cerevisiae. Interestingly, silencing of MTL3 absolutely requires the Ku70, Ku80 and Rif1 proteins, in sharp contrast to silencing of the HM loci of S. cerevisiae. On the other hand, we found that α1 and α2 genes, but not the URA3 reporter gene inserted throughout MTL3, are also repressed by Hst1, Sum1 and Rfm1 proteins, which form a repressor complex of specific genes in S. cerevisiae. This indicates that α1 and α2 are also subject to promoter-specific repression, in addition to regional silencing nucleated at the telomere. We also found that C. glabrata adheres in vitro to HeLa cells and expresses several cell-type specific genes and virulence-related genes regardless of the presence, or even absence, of mating-type information at any of the MTL loci." | |
| 2010-11 | |
| Tesis de doctorado | |
| Español | |
| Público en general | |
| BIOLOGÍA MOLECULAR | |
| Aparece en las colecciones: | Publicaciones Científicas Biología Molecular |
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